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肉苁蓉水提物体外抗氧化及对小鼠肠道菌群 紊乱的作用(一)

发布日期:2021-12-07 12:26:00

何梦梦,游林,包晓玮,魏晨业',肖子轩,李泽霖',曾兰君',王慧君',赵玉婷

1.新疆农业大学食品科学与药学学院,新疆乌鲁木齐8300522.和田帝辰医药生物科技有限公司,新疆和田848000


摘要:探究内苁蓉水提物体外抗氧化能力及对小鼠肠道菌群素乱的作用。以还原力、DPPH自由基、ABTS'自由基、O自由基清除率考察内苁蓉水提物体外抗氧化能力。以肠道菌群,脏器指数,结肠绒毛形态结构,探究内苁蓉水提物对肠道菌群紊乱作用。结果表明:内苁蒙水提物抗氧化能力与其浓度呈正相关,DPPH自由基、ABTS自由基、O5自由基的IC,值依次为:0.2251.81912.53mgml。内苁蓉水提物能够缓解抗生素导致的小鼠体质量下降及对胸腺的生长抑制,显著提高肠道菌群紊乱小鼠粪便中双岐杆菌、乳酸菌含量及BE值,对肠球菌及大肠杆菌的生长具有一定抑制作用,改善肠道菌群紊乱小鼠诱发的肠线毛变短、隐窝深度增加的现象。肉苁蓉水提物具有良好的体外抗氧化作用,能够调节肠道菌群紊乱的作用。

关键词:肉苁蓉:水提物;体外抗氧化:肠道菌群:结肠绒毛形态结构

肠道微生态由肠道菌群菌种、肠道菌群代谢物和黏膜屏障构成,可以通过肠道神经系统、神经内分泌系统及神经免疫系统调节等参与机体生理活动。肠道是机体炎症发生的最初部位,在人体代谢过程中,自由基损伤是炎症病理损伤的重要组成部分,机体未能及时清除自由基使其在机体蓄积,最终在肠道组织内产生,过量的自由基导致肠道组织结构破坏,病原菌与有害物质与肠道上皮细胞充分接触引发炎症,引起肠道菌群紊乱等叫。研究表明,肠道菌群的组成和数量与机体健康有一定联系。抗生素在合理的剂量下,能够有效抑制井杀灭病原体,在治疗疾病中发挥着重要作用。近年来,抗生素的滥用导致植物源及动物源食品抗生素超标从而导致肠道菌群紊乱引发肠道黏膜系统受损导致内部环境紊乱,不利于微生物定植,增加肠道疾病的风险-。天然植物调节抗生素引起的肠道微生态失衡已成为研究热点。

管花肉苁蓉[Cistanche tubulosaSchrenkWight], 别名大芸,主要寄生于柽柳属植物根部。近年来,肉苁蓉以广泛的药理活性及保健功效在治疗疾病、保障健康中发挥着重要的作用,市场前景乐观。国内外学者对肉苁蓉的化学成分及药理活性等进行深入的研究,药理活性的研究主要集中在激素调节、润肠通便、免疫调节、抗氧化及预防老年痴呆、神经保护、改善微循环、影响肠道菌群等药理作用-。目前,肉苁蓉调节肠道菌群紊乱的研究较少,本研究主要以还原力、DPPH自由基、ABTS'自由基、0-自由基清除能力考察肉苁蓉水提物体外抗氧化能力。通过计算肠道菌群、肠道定植能力(BE值),组织染色法观察结肠形态结构,结肠绒毛长度、隐窝深度、结肠绒毛高度/隐窝深度(VO综合考察肉苁蓉水提物对小鼠肠道菌群紊乱的影响,以期为肉苁蓉调节肠道菌群紊乱提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

管花肉苁蓉干片:和田帝辰医药生物科技有限公司:抗坏血酸(V2:国药集团化学试剂有限公司:羟甲基氨基甲烷(Tris):美国 Amresco 公司:MRS培养基:杭州生物试剂有限公司:BBL培养基:杭州百思生物技术有限公司:Pfizer肠球菌选择性琼脂、伊红美蓝琼脂:青岛高科技工业园海博生物技术有限公司:SPF级雄性C57BI6 小鼠:新疆医科大学实验动物中心24只,体质量(20±2g

1.2 仪器与设备

AL204-4C 电子天平:梅特勒-托利多仪器有限公司:XL-02A粉碎机:烨昌机械有限公司:HH-S数显恒温水浴锅、DHP-9052恒温培养箱:江苏省金坛市医疗仪器厂:TU-1810紫外可见分光光度计、JQ000453无菌操作台:苏净集团安泰公司:SX-500高压灭菌锅:日本TOMY公司:ECLIPS CI显微镜:尼康映像仪器销售(中国)有限公司

1.3 试验方法

1.3.1 肉苁蓉水提物的制备

参照葛继红等提取方法,并稍作改动。由于水的张力较大,如用粒径小于40目的肉苁蓉颗粒提取,较难过滤,故将肉苁蓉干片粉碎,取粒径在20-40目间的肉苁蓉颗粒,按料液比110gml),提取时间5h.沸水浴条件下回流提取两次,过100目滤网,抽滤,过0.45μm滤膜,浓缩成浸膏备用。

1.3.2 肉苁蓉水提物体外抗氧化作用

1.3.2.1 肉苁蓉水提物 DPPH自由基清除率的测定

参照杨冰鑫等方法,稍作改进。配置不同浓度的肉苁蓉水提物溶液,517nm处测定吸光度,VE为阳性对照,计算其清除率。

清除率%=[A-4-4)]Ax100

式中:A。为蒸馏水加DPPH溶液的吸光度:A,为待测样加DPPH溶液的吸光度:A2为待测样加蒸馏水的吸光度。

1.3.2.2 肉苁蓉水提物还原能力的测定

参照Omage方法,稍作改动。配置不同浓度的肉苁蓉水提物溶液取,700nm处测定吸光度,Ve为阳性对照。

1.3.2.3 肉苁蓉水提物ABTS·清除试验

参照蒲成伟等方法,稍作改动。配置不同浓度的肉苁蓉水提物溶液取,734nm处测定吸光度,Vc为阳




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