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肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷闪提工艺研究

发布日期:2022-01-10 10:09:00

【摘要】文章对肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷闪提工艺进行了研究,分别从肉苁蓉药材中活性成分提取工艺优化,肉苁蓉多糖的分离纯化;肉苁蓉精制多糖理化性质检测,肉苁蓉药材植物图谱的建立;肉苁蓉随机扩增DNA 多态性(RAPD) 指纹图谱等几个方面进行了详细的介绍。闪式提取法提取肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷的操作简单、提取率高、耗时短、节省能源, 可为松果菊苷和毛蕊花糖苷的新药开发和工业化生产提供依据,有着更好的推广价值。

【关键词】肉苁蓉;松果菊苷;毛蕊花糖苷;闪提工艺;工艺研究

肉苁蓉是一种化学成分十分复杂化的物质,被分类为多组分复杂体系。其自身的药材品种十分珍稀的品种,无论是贮藏、产地还是药材的加工工艺,在一定程度上有着很大的难度,是当前研究肉苁蓉药材工作人员的重点关注方向。对于肉苁蓉这一药物而言,其发挥作用是众多成分共同努力的结果,每一种化学成分都不可忽略,但是现在,这一药物的有效成分依旧是一个不明确的课题,有效成分如何发挥作用也尚未明确。因此,现在很多针对这一药物的研究往往是针对其整体或者个别化学成分进行的。相关工作人员想要有效发展中药材的前进研究,需要从质控角度下手,建立健全现代肉苁蓉的质量控制的标准体系。最为常见的肉苁蓉质量稳定性的评价方法就是指纹图谱分析技术,通过谱图反应肉苁蓉材内的化学成分种类与数量,能够提供综合信息从而较好的评价药材质量。

1 实验方法

1.1 肉苁蓉提取方式的选择 实验人员用天平精密称取3份干燥且粉状的肉苁蓉切片 10.0g。首先,提取100g 的纯净水,第一份粉状的肉苁蓉需要用回流法进行成分的有效提取,实际操作过程中,保证回流提取的次数为2 次,每一次的提取操作控制在2h 左右。第二份粉状的肉苁蓉则需要采用冷浸法进行成分的有效提取,然后提取之后,相关工作人员需要将其放在室温的环境下,遮挡全部的光线的同时,对其完全浸泡,浸泡的时间控制在2d[1]。

第三份粉状的肉苁蓉需要采用超声法对其药材内部的成本进行有效提取,实际操作过程中选择用超声提取2 次,每次的提取时间控制在1h。然后,将已经加工处理的三分粉状的肉苁蓉,通过多糖含量测定方法的正确操作,合理的对其进行多糖含量的整体分析比较,分析比较结果,结合实际需求情况,从不同的提取方法挑选出最适合的提取方式。

1.2 提取工艺考察 在实际提取工艺考察的时候,相关工作人员需要有效的取出干燥的肉苁蓉饮片,紧接着使用60℃~90℃的石油醚中进行回流提取,其中在进行回流提取的时候,需要保证石油醚的体积含量需要是干燥的肉苁蓉饮片的10 倍量体积。在回流提取的时候,需要严格控制回流提取的时长,最好控制在2h/ 次。回流提取之后,相关工作人员需要过滤掉石油醚,然后将肉苁蓉饮片进行干燥处理,紧接着用乙醇对其进行回流提取,其中在进行回流提取的时候,需要保证乙醚的体积含量需要是干燥的肉苁蓉饮片的10 倍量体积,并且乙醚的含量为80%。在回流提取的时候,需要严格控制回流提取的时长,最好控制在2h/ 次,一共进行两次,回流提取之后再对剩余

的肉苁蓉药渣过滤[2]。相关工作人员将已经烘干之后的肉苁蓉药渣,再进行蒸馏水回流提取。回流提取之后,将滤液进行合并处理,将其进行旋蒸浓缩加工操作。然后,相关工作人员需要把乙醇的浓度设置为变量,选择不同的乙醚浓度浸泡烘干后的滤渣,其中在进行浸泡的时候,需要保证乙醚的体积含量需要是干燥的肉苁蓉饮片的5 倍量体积,并且存在乙醚的室内温度以及乙醚的温度为4℃。静置过夜之后,相关工作人员合理施工离心机,将沉淀的多糖有效收集。将收集到的多糖经过真空干燥后,变成肉苁蓉粗多糖。

1.3 多糖的含量测定 采用苯酚- 硫酸法测定肉苁蓉多糖含量[3]。

2 肉苁蓉液相指纹图谱建立的实验方法

2.1 供试品溶液的制备 相关工作人员用天平精密称取干燥且粉状的肉苁蓉切片1.0g。首先,在1.0g 干燥且粉状的肉苁蓉切片中添加甲醇,甲醇的体积控制在50mL。之后用超声提取溶液,此时需要控制超声提取的时间,需要将其控制在30min 的时长,在提取过程中,相关工作人员需要及时使用甲醇溶液补重量。30min 之后,相关工作人员将提取的取续滤液5mL,将其完全蒸干之后。继续在容器中添加足量的甲醇溶液,彻底溶解之后,将溶液转移到10mL容量瓶。相关工作人员添加甲醇溶液,直到溶液高度到达容量瓶的刻度,停止添加甲醇溶液。相关工作人利用0.45µm 微孔滤膜有效滤过溶液,将溶液保存好,准备备用。

2.2HPLC-UV 色谱条件 相关工作人员广泛的查阅相关文献资料,结果显示,试验可以通过色谱条件的优化、比较以及筛选,最终得到的结合可以很好的明确色谱条件:色谱柱 Kromasil(250×4.6 mm,5µm),,分析时间共设置为90min,进样量为10µl,流动相为0.5% 醋酸水(B) 以及乙腈(A) 梯度洗脱,将其流速控制在1.0mL/min,检测波长为310nm,柱温为28℃[4]。

2.3 方法学考察 从精密度实验、重复性实验以及稳定性实验等对其结果进行有效验证。

3 总结

文章选择使用多种柱色谱联合的方式,有效实现了肉苁蓉粗多糖的分离以及纯化,与此同时,相关工作人员还用现代分析技术对其进行理化性质的测定。该实验过程与结果,为工作人员研究肉苁蓉的质量控制提供参考意义。建立肉苁蓉HPLC-DNA 指纹图谱,并进行相似度评价和聚类分析,以期为肉苁蓉的科学鉴定和质量标准提供参考依据。

参考文献

[1] 初侨, 席兴军, 杨丽. 肉苁蓉中松果菊苷和毛蕊花糖苷闪提工艺研究[J]. 食品研究与开发,2015,36(16):49-52.

[2] 王茜, 王啟之, 时维静, 等. 响应面法与正交设计法优化黄蜀葵总黄酮闪提工艺比较[J]. 安徽科技学院学报,2015,29(05):24-31.

[3] 周康, 刘延泽, 王中博, 等. 积雪草苷的闪提工艺优选及不同提取方法的比较研究[J]. 中国中药杂志,2011,36(23):3265-3267.

[4] 董洁琼, 王意敏, 李建霞, 等. 激素诱导和非生物胁迫对虎杖根中白藜芦醇含量影响及虎杖根中白藜芦醇闪提工艺优化[J]. 食品工业科技,2016,37(21):210-215.


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